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Extraction d'ADN

L'ADN (acide désoxyribonucléique) est la molécule qui porte l'information génétique de tous les êtres vivants. Dans ce TP, nous allons extraire et visualiser l'ADN à partir de cellules végétales.

Objectifs

  • Comprendre le principe de l'extraction d'ADN
  • Réaliser un protocole d'extraction simple
  • Observer l'ADN à l'oeil nu
  • Comprendre la structure de l'ADN

Matériel nécessaire

  • Banane mûre ou oignon
  • Liquide vaisselle
  • Sel de table (NaCl)
  • Alcool à 90° très froid
  • Mixeur, passoire, béchers, tige en verre

Protocole expérimental

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1. Préparation du matériel biologique

Coupe une demi-banane en petits morceaux. Mixe-la avec 100 mL d'eau et une cuillère de sel. Le sel aide à neutraliser les charges de l'ADN.

Conseil : Utilise une banane bien mûre, ses cellules sont plus fragiles.
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2. Lyse des cellules

Ajoute une cuillère de liquide vaisselle et mélange doucement pendant 5 minutes. Le détergent dissout les membranes cellulaires et libère le contenu des cellules.

Conseil : Ne mélange pas trop fort pour éviter de casser l'ADN.
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3. Filtration

Filtre le mélange à travers une passoire fine ou un tissu. Récupère le filtrat (liquide) dans un bécher. Ce filtrat contient l'ADN en solution.

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4. Précipitation de l'ADN

Verse délicatement un volume égal d'alcool froid le long de la paroi du bécher, pour qu'il forme une couche au-dessus du filtrat. Laisse reposer 2-3 minutes.

Conseil : L'alcool doit être très froid (congélateur) pour que l'ADN précipite.
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5. Récupération de l'ADN

Des filaments blanchâtres apparaissent à l'interface. Enroule-les autour d'une tige en verre en tournant doucement. C'est l'ADN !

Conseil : Ces filaments sont des milliers de molécules d'ADN agglutinées.

Résultats attendus

L'ADN extrait forme une masse blanchâtre et filamenteuse. Cette "méduse" d'ADN contient des millions de molécules. Chaque cellule de banane contenait 11 paires de chromosomes, soit environ 500 millions de paires de bases.

Conclusion

L'extraction d'ADN repose sur trois principes : 1) Lyse des membranes (détergent), 2) Neutralisation des charges (sel), 3) Précipitation dans l'alcool. Cette technique simplifiée est à la base des méthodes utilisées en laboratoire de génétique.

Questions de compréhension

Quel est le rôle du liquide vaisselle dans l'extraction ?
Réponse : Il dissout les membranes cellulaires (phospholipides) et libère le contenu des cellules, dont l'ADN.
Pourquoi ajoute-t-on du sel ?
Réponse : Le sel neutralise les charges négatives de l'ADN, permettant aux molécules de se rapprocher et de précipiter.
Pourquoi l'alcool doit-il être froid ?
Réponse : L'ADN est moins soluble dans l'alcool froid, ce qui favorise sa précipitation sous forme visible.

Pour aller plus loin

  • Comparer l'ADN de différents organismes
  • Découvrir la PCR (amplification de l'ADN)
  • Étudier le séquençage du génome
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